標(biāo)題：?jiǎn)栂录t血球的螢光染色用nile red是否合適！顯微鏡百科
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2012-1-19 1:42:45
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正文:
關(guān)于紅血球的螢光染色用nile red是否恰當(dāng)
我的的染色步驟是先取3ul的血球溶到等滲透壓的蔗糖水溶液內(nèi)加以輕微晃動(dòng)分散，
接著將nile red染劑2ul加入，一樣輕微晃動(dòng)5分鐘使其均勻溷和，最后以離心置換蔗糖
水溶液的方式將多馀的染劑去除掉(清洗兩次)，再加入調(diào)整過(guò)導(dǎo)電度的等滲透壓buffer
可是問(wèn)題來(lái)了，經(jīng)過(guò)離心清洗過(guò)后紅血球變得相當(dāng)難分散，在顯微鏡底下確認(rèn)過(guò)都聚集
成一團(tuán)一團(tuán)的狀況，想請(qǐng)教的問(wèn)題是有可能是nile red的影響導(dǎo)致抗凝血?jiǎng)┦幔?br />或是說(shuō)抗凝血?jiǎng)┍旧碛袉?wèn)題?
北京上光儀器回復(fù)：
是用 EDTA tube (紫頭管)嗎? PBS 洗三次, EDTA 洗掉, 凝血因子也洗掉了還會(huì) agglutination 大概是沒(méi)洗乾淨(jìng) 還有, 高濃度的 sucrose 會(huì)抑制 agglutinationFYI, 洗乾淨(jìng)的 RBC, 室溫一個(gè)禮拜都不會(huì) agglutination. (沒(méi)乾掉的話)
如果PBS洗完還是一堆 agglutination, 我猜是採(cǎi)血完沒(méi)跟 EDTA mix 均勻
抽血, 確定馬上抽完馬上mix均勻
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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