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植物病毒感染簡(jiǎn)易光學(xué)顯微鏡診斷法！

    一般而言，植物病毒感染后皆可在組織內(nèi)產(chǎn)生特有的內(nèi)含體（inclusion），此種內(nèi)含體可能為聚集之病毒顆粒、病毒基因的產(chǎn)物等，這些內(nèi)含體經(jīng)過(guò)特殊的染色過(guò)程后，可與正常的細(xì)胞成分在呈色反應(yīng)上有顯著區(qū)別，而可在一般光顯微鏡下檢查出來(lái)(圖5.5和圖5.6)。
此種染色法所采用的材料大部份是新鮮的植物表皮組織，一般是用5號(hào)鑷子撕下下表皮而直接放入染色液內(nèi)染色，于經(jīng)過(guò)酒精脫色后，再以2-methoxyethyl acetate（2-甲氧基乙基醋酸）處理，即可封埋于載玻片上，利用光學(xué)顯微鏡油浸鏡頭觀察之。全部之染色過(guò)程所需過(guò)程少于30分鐘。染色方法有Azure A（紫紅核酸染劑）及Calcomine orange-Luxol brilliant green（橙綠蛋白質(zhì)染劑）二種，前者是針對(duì)內(nèi)含體有核蛋白或核酸成份者，如Cucumber mosaic virus所引起之內(nèi)含體(圖5.5)，后者是用來(lái)染色內(nèi)含體為蛋白質(zhì)性質(zhì)者，如Tobacco mosaic virus所引起之細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含體(圖5.6)

 圖5.5感染Cucumber mosaic virus的甜椒表皮組織顯微鏡照片，經(jīng)紫紅核酸染劑染色，可看到中空的晶體狀內(nèi)含體
(C)。N:細(xì)胞核


圖5.6 感染Tobacco mosaic virus的表皮組織顯微鏡拍攝照片，經(jīng)橙綠蛋白質(zhì)染劑染色后，可在細(xì)胞內(nèi)看到晶體內(nèi)含體(箭頭)。N:細(xì)胞核，S:氣孔。