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作者:YIYI發(fā)布
時(shí)間:2012-3-9 10:53:41
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正文:
實(shí)驗(yàn)步驟
1.
在培養(yǎng)皿中滴入數(shù)滴flush 培養(yǎng)液,并以礦物油覆蓋
2.
將培養(yǎng)皿放入37C, 5% CO2培養(yǎng)箱待用
3.
再取兩個(gè)培養(yǎng)皿,其一放入適量Hyaluronidase;另一放入數(shù)滴flush培養(yǎng)液備用。
4.
將母鼠斷頸,腹部朝上放置,以70% 酒精消毒。
5.
在解剖顯微鏡下以解剖剪刀將母鼠外皮剪開至胸部,接著剪開母鼠皮下肌肉層,至內(nèi)臟清楚可見,如圖示。
6.移開內(nèi)臟,找出位于母鼠背部兩側(cè)子宮,以器具清除周圍組織。
7.
找出輸卵管膨大處,于膨大處與卵巢及子宮交界處剪開,單獨(dú)分離出輸卵管膨大的部分。如圖所示。
8.
將切出的輸卵管放入含hyaluronidase的培養(yǎng)液中,并拿至解剖顯微鏡下,找出輸卵管膨大透明部位。
9.
以小號(hào)鑷子,在解剖顯微鏡下小心撕開膨大處,此時(shí)內(nèi)部卵子可輕易順勢(shì)流出,接著將輸卵管移開。
10.
將卵子于室溫下放置約1-2分鐘,待周圍組織分解后,可清楚在顯微鏡下觀察卵子。
11.
以口吹式毛細(xì)管將受精卵吸出移至flush培養(yǎng)液中沖洗數(shù)次。
12.
將卵子放入flush培養(yǎng)液中,并放入37C, 5%CO2培養(yǎng)箱中等待顯微注射。
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