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正文:
激光掃描
顯微鏡在
生物學(xué)上的應(yīng)用!最好的國(guó)產(chǎn)
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共焦雷射掃描顯微鏡在生物學(xué)上的應(yīng)用有很多,其中最多應(yīng)用的是掃描生物樣本的影像。生物樣本具有幾個(gè)特性,首先樣本通常有良好的透光性以及反射率,經(jīng)由物鏡聚焦的光才能夠深入樣本,位在物
鏡的焦平面上的樣本反射此聚焦光,成為樣本的斷層影像的訊號(hào)來(lái)源。其次,具備透明度的樣本有對(duì)應(yīng)的折射率,
如樣本當(dāng)中具有幾種不同部份的組織,因不同生物組織(tissue)具有不同折射率,因此被物
鏡聚焦后的邊緣光線(marginal rays)與近軸光線(paraxial rays)經(jīng)過(guò)不同的生物組織,折射的程度也不相同。最后,當(dāng)樣本浸在液體里時(shí),因?yàn)闃颖緯?huì)流動(dòng)不易被觀察,
所以,我們放置具有特定厚度與折射率的
蓋玻片在樣本上以固定樣本;因而經(jīng)由物鏡聚焦的邊緣光線和近軸光線,分別經(jīng)過(guò)蓋玻片、樣本組織以及樣本周圍的液
體,其光程徑(optical path length)均不相同,無(wú)法完美地會(huì)聚在物鏡的焦點(diǎn)上,部份邊緣光線是匯聚在焦點(diǎn)鄰近處。如從幾何光學(xué)來(lái)看,此為球面像差所造成的現(xiàn)象,我們稱此球面像差為樣本引入的球面像差(specimen-induced spherical aberration),此球面像差在樣本有著折射率不一致(refractive-index mismatch)的情況下發(fā)生
共焦顯微鏡系統(tǒng)中使用的物鏡通常是高數(shù)值孔徑 (NumericalAperture,NA) 的物鏡,
因此當(dāng)入射光經(jīng)由物鏡聚焦進(jìn)入樣本,并在樣本當(dāng)中經(jīng)過(guò)由不同折射率構(gòu)成的介面時(shí)[12],球面像差就會(huì)產(chǎn)生,經(jīng)由
物鏡聚焦后的光不再完美地會(huì)聚于物鏡的焦點(diǎn)[13],因而大幅地降低共焦雷射掃描顯微鏡主要偵測(cè)的訊號(hào)強(qiáng)度,并且因某部份邊緣光線會(huì)聚至鄰近焦點(diǎn)處,增強(qiáng)了離焦面的反射光強(qiáng)度,于是共焦雷射掃描顯微
鏡的光學(xué)斷層能力就會(huì)下降,例如斷層影像的對(duì)比度會(huì)降低,更遑論重建樣本的三維影像。因此,如能降低由樣本引入的球面像差,我們就能夠改善生物樣本的影像品質(zhì),得到樣本相關(guān)的資訊以供研究或判斷。
出自http://www.xianweijing.org
金相顯微鏡百科
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北京顯微鏡百科
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