標(biāo)題：透過生物顯微鏡觀察共生藻和珊瑚蟲
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作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2012-12-20 23:24:55
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正文:
珊瑚（Stylophora pistillata）進(jìn)行實(shí)地觀察、實(shí)驗(yàn)研究，藉以探究其與共生藻(zooxanthellae)之關(guān)系。
透過複式顯微鏡觀察共生藻和珊瑚蟲。使用細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)算共生藻數(shù)量，再除以珊瑚分枝面積可得共生藻密度。影響珊瑚白化最劇烈的因子是海水溫度的極端高低溫變化。
因此，測量棲地水溫為本研究監(jiān)測對象。實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：短時(shí)間內(nèi)水溫劇烈降低或稍長時(shí)間溫度穩(wěn)定上升超出珊瑚適應(yīng)范圍，共生藻密度隨之減少，造成白化
不同種類的珊瑚蟲大小不同，從 1 ㎜到＞10 ㎝都有。珊瑚蟲身體的表皮層為兩個(gè)胚層組成。
外面一層稱為外胚層的細(xì)胞層是表皮層，里面稱為內(nèi)胚層的細(xì)胞層是胃皮層。共生藻居住在珊瑚蟲的內(nèi)胚層中。
複式顯微鏡（100×）下殘留的珊瑚蟲近照）。
a.以顯微鏡觀察確定細(xì)胞經(jīng)過 24-48 小時(shí)培養(yǎng)之后沒有污染現(xiàn)象。
b.觀察細(xì)胞是否已經(jīng)形成單層 （monolayer） 的現(xiàn)象，第三天可更新細(xì)胞培養(yǎng)液；
若是仍為懸浮狀，則維持觀察，依實(shí)際的情形再做決定
從恒溫培養(yǎng)箱取出已長有 70 %-80 % 滿盤的細(xì)胞培養(yǎng)盤 (flask) ，經(jīng)過顯微鏡觀察無任何的污染現(xiàn)象，
噴灑 75 % 酒精之后置于無菌操作臺(tái)，操作前擦乾再以火消毒瓶口。c. 吸去培養(yǎng)液，加入 10 ml PBS 緩衝溶液緩慢沖洗一次之后吸去；
再加入適量的 1X Trypsin-EDTA，均勻的潤濕細(xì)胞之后將多馀的Trypsin-EDTA 吸出棄之，
再將細(xì)胞培養(yǎng)盤置于恒溫培養(yǎng)箱中 3-5 分鐘 (不需放松瓶蓋) 。d. 輕拍培養(yǎng)盤身，見細(xì)胞由培養(yǎng)盤底順利剝離，
經(jīng)過顯微鏡觀察，見其為顆粒狀之細(xì)胞狀態(tài)而非整塊剝離即置于無菌操作臺(tái)
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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