標(biāo)題：微生物細(xì)胞的成像熒光顯微鏡-微生物膜研究
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2014-1-19 19:00:19
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正文:
多光子激發(fā)熒光顯微技術(shù)
在多光子激發(fā)熒光顯微技術(shù)中，熒光發(fā)色團(tuán)是被兩個或更多的比發(fā)射光波長
更一長的光子所激發(fā)的。
因為激發(fā)只發(fā)生在顯微鏡的焦點(diǎn)上，所以不對準(zhǔn)焦點(diǎn)的就吸收的很少，
因此有更多的激發(fā)光到達(dá)聚焦平面。在原理上，多光子激發(fā)熒光顯微技術(shù)法有
三個主要優(yōu)點(diǎn):具有很強(qiáng)的穿透厚樣品的能力;采用紅外光激發(fā)而實(shí)現(xiàn)對活細(xì)胞光
損傷最小化，以及減少聚焦平面外的光漂白
多光子顯微技術(shù)在改善深嵌于植物組織中的微生物細(xì)胞的成像方面具有很大的應(yīng)用
潛力。因為其他類型顯微鏡照明用的紫外光會引起植物細(xì)胞受到一定程度的光損傷，
所以多光子顯微技術(shù)對于植物表面上具有紫外吸收能力的熒光發(fā)色團(tuán)標(biāo)記的細(xì)菌細(xì)胞的
顯微成像非常有用。這為微生態(tài)研究入員提供更多的可用熒光發(fā)色團(tuán)，來研究在植物
環(huán)境中細(xì)菌的行為。但是有證據(jù)表明，實(shí)際_仁聚焦體積內(nèi)的光漂白效應(yīng)比單光子激發(fā)
更嚴(yán)重，特別是對于薄的樣品。甚至對于綠色熒光蛋白(GFP)這種被認(rèn)為是相
對穩(wěn)定的熒光分子也是如此。但是，更進(jìn)一步限制該技術(shù)在植物微生物學(xué)中應(yīng)用的事
實(shí)也許是，多光子顯微技術(shù)本身的分辨率始終比單光子顯微鏡技術(shù)(如CISM )低。
盡管如此，多光子顯微技術(shù)大大改善了植物組織的三維成像效果，但實(shí)際上
該技術(shù)僅適用于尺寸較大的微生物的成像，而不適用于細(xì)菌。據(jù)我們所知，目前多光
子顯微技術(shù)主要應(yīng)用于微生物學(xué)生物膜的研究上。隨著價格低廉的多光子顯微鏡的推出，
時間會告訴我們多光子顯微技術(shù)是否有利于對植物
表面上或內(nèi)部的細(xì)菌細(xì)胞進(jìn)行成像。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
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