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正文:
用
熒光顯微鏡分析在蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞
直到20世紀(jì)初,1912年勞厄(德國(guó)的物理學(xué)家)第一次成功獲得晶
體對(duì)X射線的衍射線的圖案,才使研究深人到晶體的內(nèi)部結(jié)構(gòu),
才從本質(zhì)上認(rèn)識(shí)了晶體,證實(shí)了晶體內(nèi)部質(zhì)點(diǎn)空間是按一定方式
有規(guī)律地周期性排列的,提出了物質(zhì)
微觀結(jié)構(gòu)的幾何形態(tài),如離
子晶體結(jié)構(gòu)、原子晶體結(jié)構(gòu)等。
1在蓋玻片上培養(yǎng)細(xì)胞,不同的是用標(biāo)準(zhǔn)的22mm X 22mm蓋
玻片代替其中的長(zhǎng)方形蓋玻片。洗凈細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì),與Pyranine脂質(zhì)體一同孵
育,洗去未結(jié)合的脂質(zhì)體。
2用
熒光顯微鏡分析時(shí),將蓋玻片丑于標(biāo)準(zhǔn)的載玻片上,僅密封兩平行邊。這樣
便于更換蓋玻片下的溶液,如可用薄紙將溶液從一側(cè)吸出,在另一側(cè)加人新鮮
溶液。
3將蓋玻片置于裝有適合于Pyranine的激發(fā)和發(fā)射光濾光器的
熒光顯微鏡上,使
細(xì)胞處于焦點(diǎn)位置。通常需要X6。的物鏡以達(dá)到足夠的激發(fā)光強(qiáng)度。
4以適合于Pyranine的兩束不同激發(fā)光照射樣品,采集各細(xì)胞區(qū)域的圖像。
必須注意避免任何的細(xì)胞移動(dòng)。必須在非自動(dòng)的固定增益模式下操作極像裝
置。因?yàn)闄z測(cè)器增益、黑色電平及光電管電壓‘如為視頻裝置)的自動(dòng)調(diào)整
可能補(bǔ)償樣品的不同熒光強(qiáng)度水平,從而使所要觀察的pH一依賴的熒光變化
不明顯。
出自http://www.bjsgyq.com/
北京顯微鏡百科
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