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正文:

螢光抗體的原理顯微鏡標(biāo)本之製作
(一)  玻片及蓋玻片 (Slide and Coverslips)
　　玻片及蓋玻片品質(zhì)必須很好而沒(méi)有螢光，玻片厚度 ≦1.0mm 者便可用，玻片之清洗，必須以中性清潔劑洗淨(jìng)，再浸于含有 3％HCl 之乙醇 12～24 小時(shí)，然后再儲(chǔ)存于純酒精。要用時(shí)，以清潔紗布擦淨(jìng)或火焰烘乾。用完后可浸于水中，移去封埋物，再經(jīng)清潔劑及重酪酸－硫酸溷合物＊處理。
　　�。�重酪酸一硫酸溷合物之配法：
　　　　粗製重酪酸鉀　　　　　300 gm
　　　　 20％ 硫酸水溶液 　　　3000 ml
　　使用琺瑯質(zhì)或陶質(zhì)容器，先放入 20％ 硫酸水溶液，然后緩緩加入粗製重酪酸鉀，以玻璃棒攪拌，此時(shí)會(huì)發(fā)熱，俟冷卻后使用。
　　目前已有處理好的玻片出售，使用上甚為方便。
(二)  組織切片 (Tissue Sections)
　　組織切片愈薄愈好 (4μ)，如果切片太厚，則可能自體及非特異螢光增加，目前都用冷凍切片機(jī) (Cryostat) 來(lái)切，冷凍切片機(jī)包括冰凍柜 (Refrigerated Cabinet)，溫度在 0℃～-30℃ 之間，切片機(jī) (Microtome) 放在裡面，將組織在 -20℃ 冰凍 10 分鐘，就可以切，切下之薄片，以玻片捺下后在室溫急速乾燥。製備好之切片必須儘可能馬上固定及染色。如果切片必須儲(chǔ)放短時(shí)間 ( 約 1 週 )，則固定后密封儲(chǔ)放于 -70℃，要染色時(shí)，切片必需回溫到室溫方啟開(kāi)。
(三)  細(xì)胞培養(yǎng)法 (Cell Culture Preparation)
　　細(xì)胞培養(yǎng)法一般用蓋玻片在組織培養(yǎng)盤(pán) ( 例如 24 孔 )或培養(yǎng)在玻璃片 (Chamber Slide) 上，再和普通接種病毒一樣，接種可疑病材乳劑，培養(yǎng)數(shù)天，取出，乾燥、固定、水洗，再用標(biāo)示抗體染色以檢查特異螢光。
(四)  涂抹法或捺壓法 (Smear and Impression Preparation)
　　所用玻片需很薄，一般用蓋玻片代用，將所要檢查之病材，如血液、組織液或其他病材，在玻片上涂抹或捺壓，涂抹或捺壓片在室溫用吹風(fēng)機(jī)或電風(fēng)扇 ( 以冷風(fēng)吹乾 )，以甲醇或丙酮固定，放于密封顯微鏡標(biāo)本箱于 -20℃ 備染或馬上染色。
(五)  固定 (Fixation)
　　除了使組織固定于玻片外，另一方面亦可助抗原－抗體複合物之形成，例如把脂質(zhì)溶解，使抗體抗原較易反應(yīng)。一般用 100％ Methanol 在室溫作用 2 分鐘，或丙酮于 -20℃ 下 10 分鐘來(lái)固定微生物抗原及病毒。

出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科