標題：電鏡實驗室現(xiàn)代細胞生物學研究細胞結構和分離
信息分類:站內新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2016-12-4 2:30:34
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正文:
電鏡實驗室現(xiàn)代細胞生物學研究細胞結構和分離
免疫標記
在現(xiàn)代細胞生物學研究中，在細胞結構和分離得到的大分子中
對抗原進行免疫標記顯得相當重要。免疫標記技術可以在樹脂包埋
生物材料前／后應用(包埋前／后標記，，也可以與負染色法(詳見
實驗方案2．3)、玻璃化法以及金屬投影技術很好地結合。膠體金
是連接抗體(IgG／Fab／Fab’)或者其他配體如蛋白A／蛋白G、卵
白素／抗生物素蛋白鏈菌素(生物素化的蛋白)以及凝集素的最常用
的高電子密度標記物�？梢再徺I到的膠體金顆粒直徑為1～20nm不
等，可以在同一組織上利用不同大小的膠體金標記的抗體(二抗)作
多重標記。包埋后最重要的是抗原性的保持。包埋后標記的一個潛
在困難就是待測抗原決定簇可能經受不了在脫水、包埋之前常規(guī)應
用高濃度固定劑[如3％戊二醛(體積分數(shù))]進行組織固定。所以，2
％甲醛一o．5％戊二醛(體積分數(shù))常用于固定，它們可以保存細胞
蛋白質的抗原性，但是對于組織結構的固定效果就略顯不足。近來
可以購買到1．4nm金顆粒(NanogoldTM)標簽以及o．8nm 11金標簽
。這些探針可與抗體和鏈親和素連接，在將來可能對高分辨率的細
胞及大分子標記領域產生越來越深遠的影響。
專門技術
真空鍍膜術、超薄切片術、冰凍超薄切片術、高壓凍存術、冷
凍置換術、冰凍斷裂術以及活塞冰凍術的使用都不包括在本書的范
圍之內，在別處都能找到完全的操作步驟，但是建議最好直接從電
鏡實驗室的技術人員或科研人員處學習。通常在局部的統(tǒng)籌安排和
資金的支持下，電鏡實驗室的工作人員會作為服務性角色向實驗室
的所有儀器使用人員提供相關
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科