標(biāo)題：熒光顯微鏡細(xì)胞成像中的應(yīng)用-熒光蛋白影像
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2017-3-12 3:03:04
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正文:
緊湊的桶狀結(jié)構(gòu)和內(nèi)在的發(fā)色團(tuán)是水母和珊瑚突變體的特征性
結(jié)構(gòu)。這些結(jié)構(gòu)可以保護(hù)細(xì)胞的環(huán)境免受發(fā)色團(tuán)光化裂解產(chǎn)物的影
響，也可以保護(hù)發(fā)色團(tuán)免受熒光衰竭因素的影響。在成像時(shí)通常遇
到的兩個(gè)此類因素是光漂白和pH過高或過低。熒光團(tuán)的光漂白(激
發(fā)導(dǎo)致的破壞)目前了解較少，但卻是熒光成像的限制因素。熒光
光漂白現(xiàn)象有時(shí)通過光漂白量子場和時(shí)問常數(shù)來描述，但對(duì)于細(xì)胞
生物學(xué)者，和其他的熒光素相比更常見，也更實(shí)用。例如，EBFP比
ECFP容易發(fā)生光漂白，而ECFP比EGFP或者EYFP更易發(fā)生光漂白。據(jù)
報(bào)道，DsRed或mRFPl比EGFP更易發(fā)生光漂白。
熒光蛋白在pKa值在4．5～8．0之間時(shí)對(duì)pH比較敏感。然而，
許多突變體，如黃色熒光蛋白，選擇性變異可使這種pH敏感性降至
中等水平。
作為一種獨(dú)特的、遺傳密碼編碼的熒光素標(biāo)記，GFP或其他熒
光蛋白在活細(xì)胞成像中的應(yīng)用非常廣泛。作為一種成像標(biāo)記，他們
的用途包括：細(xì)胞內(nèi)蛋白定位，蛋白質(zhì)通過分泌、內(nèi)吞途徑的轉(zhuǎn)運(yùn)
，蛋白質(zhì)出核和入核，細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器追蹤以及有機(jī)體內(nèi)細(xì)胞示蹤。
熒光蛋白被用作監(jiān)測多種生化因素的敏感分子，如細(xì)胞內(nèi)pH、細(xì)胞
內(nèi)的鈣離子以及細(xì)胞不同部位的蛋白磷酸化。除了生化參數(shù)外，遺
傳編碼的感受器在監(jiān)測基因表達(dá)和細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作
用等方面，可加強(qiáng)活細(xì)胞的成像能力。
下面討論的問題應(yīng)該被認(rèn)為是制作活細(xì)胞熒光蛋白影像的開端
。具體方案和步驟因試劑、設(shè)備，甚至同一設(shè)備配置的不同而不同
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
特別聲明：本文出自北京上光儀器有限公司-未經(jīng)允許請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，本文地址：http://www.bjsgyq.com/news/9565.html
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