葉片透化法(2)北京金相顯微鏡版權
信息分類:金相文章
作者:yiyi發(fā)布
時間:2011-12-10 17:43:56
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葉片透化法(2)北京金相顯微鏡版權
一、固定
取一片健康或感病之葉片，以FPA固定液直接進行固定，必須輕滴，蓋過整片組織。固定24 hrs后水洗。
二、透化
利用飽和之水化氯醛進行透化24 hrs以上，依葉片組織不同，需透化之天數從數天至一個月，但透化過久較不易染色�？稍谛瓋冗M行透化，透化液需蓋滿整個組織，經抽氣30 min后靜置。若葉片很厚色素很多，則需更換透化液，透化液可重復利用。染色前先多次以水完全洗去透化液，才能接受下一階段之染色。
三、染色
（1）以0.1％玫瑰紅（Rose bengal）水溶液染色一分鐘后水洗封片�；�
（2）以甲苯胺藍O直接染色10-15 min，水洗封片�；�
（3）以（2）染色后水洗，再以（1）染色20秒，水洗封片。
葉片透化法前需要準備器材及消耗品
植物材料：葉片 如桂花葉
酒精
5％NaOH
加熱器
chloral hydrate
蒸餾水
50％酒精
0.5％ safranin、95％酒精、100％酒精、二甲苯
封片膠
毛筆或小紙片
明視野顯微鏡*1
解剖顯微鏡*1
四、用途
1. 可用以觀察葉片上氣孔之分布、表皮細胞之排列及葉脈之走向。
2. 可用以觀察病原菌入侵葉片后菌絲之分布及走向。
五、藥品配制
※FPA固定液：福爾馬林5 ml、丙酸5 ml、50％酒精90 ml。
※透化液：水化氯醛（Chloralhydrate） 250 g/100 ml 無菌水。
※甲苯胺藍O（Toluidine blue O）：0.05％甲苯胺藍O，以0.05 M枸緣酸緩沖液配制。
一、固定
取一片健康或感病之葉片，以FPA固定液直接進行固定，必須輕滴，蓋過整片組織。固定24 hrs后水洗。
二、透化
利用飽和之水化氯醛進行透化24 hrs以上，依葉片組織不同，需透化之天數從數天至一個月，但透化過久較不易染色�？稍谛瓋冗M行透化，透化液需蓋滿整個組織，經抽氣30 min后靜置。若葉片很厚色素很多，則需更換透化液，透化液可重復利用。染色前先多次以水完全洗去透化液，才能接受下一階段之染色。
三、染色
（1）以0.1％玫瑰紅（Rose bengal）水溶液染色一分鐘后水洗封片�；�
（2）以甲苯胺藍O直接染色10-15 min，水洗封片�；�
（3）以（2）染色后水洗，再以（1）染色20秒，水洗封片。
葉片透化法前需要準備器材及消耗品
植物材料：葉片 如桂花葉
酒精
5％NaOH
加熱器
chloral hydrate
蒸餾水
50％酒精
0.5％ safranin、95％酒精、100％酒精、二甲苯
封片膠
毛筆或小紙片
明視野顯微鏡*1
解剖顯微鏡*1
四、用途
1. 可用以觀察葉片上氣孔之分布、表皮細胞之排列及葉脈之走向。
2. 可用以觀察病原菌入侵葉片后菌絲之分布及走向。
五、藥品配制
※FPA固定液：福爾馬林5 ml、丙酸5 ml、50％酒精90 ml。
※透化液：水化氯醛（Chloralhydrate） 250 g/100 ml 無菌水。
※甲苯胺藍O（Toluidine blue O）：0.05％甲苯胺藍O，以0.05 M枸緣酸緩沖液配制。
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