標(biāo)題：細(xì)胞的冷凍與解凍？購買一臺(tái)細(xì)胞觀察的顯微鏡！哪家最好？
信息分類:站內(nèi)新聞
作者:yiyi發(fā)布
時(shí)間:2012-5-9 17:00:00
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正文:
細(xì)胞的冷凍與解凍
在細(xì)胞冷凍方面，將長滿在 T75 flask 中細(xì)胞用 trypsin-EDTA 打散成單細(xì)胞
懸浮液，以 1500 rpm 離心 5 分鐘，倒掉上清液，加入預(yù)先配置好的冷凍保存液，
混合均勻后，以 1.0 ml 分裝于冷凍保存管中，放置于-4℃, 15~30 分鐘，再移至
-20℃, 15~30 分鐘, 然后放在-80℃, 16~18 小時(shí)，最后保存在液態(tài)氮保存筒中備
用。
在細(xì)胞解凍方面，迅速取出放置于液態(tài)氮保存筒中的細(xì)胞冷凍保存管，然
后在 37℃ 水浴中來回震盪，使之快速解凍，解凍后取出放置在含有 10 ml RPMI
1640 培養(yǎng)液的 T75 flask 中，最后放置在 37℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3. Vaccinia virus 病毒株之增殖
將 BHK-21 細(xì)胞培養(yǎng)于含有 10 ml 上述培養(yǎng)液之 T75 flask 培養(yǎng)瓶中至長滿
底面積的 60%時(shí)，以 vaccinia virus M.O.I = 0.1 去感染 BHK 21 細(xì)胞，之后放置
于 37℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 18~20 小時(shí)，然后取出部份上清液，以病毒斑形
成試驗(yàn)測(cè)定病毒效價(jià)
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科
特別聲明：本文出自北京上光儀器有限公司-未經(jīng)允許請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，本文地址：http://www.bjsgyq.com/news/2937.html
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