標題：細胞影像綠色熒光細胞和發(fā)育生物分析顯微鏡
信息分類:站內新聞
作者:yiyi發(fā)布
時間:2017-3-12 3:02:49
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正文:
作為活細胞影像工具的GFP
水母(Aequorea victoria)綠色熒光蛋白(GFP)已經成為研究細
胞和發(fā)育生物學很有價值的一種工具。緊湊的桶狀結構和3一縮氨
酸發(fā)色團是形成功能熒光蛋白所必需的，但是它具有很強的延展性
，可發(fā)生氨基酸替代。因此，發(fā)色團內部或周圍隨機和直接突變會
改變激發(fā)和發(fā)射光譜，并產生較亮的分子。WtGFP的吸收峰為397nm
和475nm。504 nlTl是另外一個綠色的激發(fā)峰值。65位絲氨酸的替
代使WtGFP的主要和次要吸收峰變成了一個單一的489nm的峰，但仍
為綠色熒光。這類分子的普遍形態(tài)EGFP，即加強的GFP通常還有其
他氨基酸替代和密碼子置換，可在哺乳動物細胞高效表達。T203Y
以及$65G突變可使吸收和發(fā)射波峰發(fā)生紅向移動，產生黃色熒光蛋
白(EYFP)。發(fā)色團內Y66若被組氨酸或色氨酸取代，可使吸收和發(fā)
射峰值發(fā)生藍向移動，分別產生藍色和藍綠色熒光蛋白(EBFP和ECP
F)。
水母突變體的光譜未發(fā)生紅移，沒有超出黃色蛋白的范圍，但
是其他海洋生物的熒光蛋白延伸到了紅色熒光區(qū)。例如，從異輻海
葵(Hetractis crispa)提出的HcRed蛋白和從珊瑚(Discosoma)克隆
出的DsRed蛋白。隨著緩慢的繁殖這些蛋白質首先疲軟，然后在低
濃度下發(fā)生自我交結，但是氨基酸的替代可以減少繁殖的次數(shù)，并
破壞四聚體產生二聚體甚至單體。
出自http://www.bjsgyq.com/北京顯微鏡百科